分享一篇发表在JACS上的文章，文章标题“Chemically Engineered Affinity Protein Drugs for Covalent Targeted Cancer Therapy”，文章的通讯作者是来自上海交通大学的颜德岳教授和夏小霞教授。其中颜德岳课题组主要从事抗肿瘤新药和药物递送领域方面的研究。

亲和蛋白（Affinity protein）是一类体积小、靶标亲和力高、结构灵活的支架蛋白。纳米抗体即为亲和蛋白的一类。亲和蛋白靶向速度快、组织渗透能力强的特性使之有望成为单克隆抗体的替代品。目前也已发展出共价亲和蛋白以克服其易于被肾脏降解、肿瘤滞留时间短等局限。然而，共价亲和蛋白的制备通常涉及UAA插入，这导致其产量较低，制备规模难以扩大。本文，作者设计了一种使用SuFEx 潜伏弹头直接修饰蛋白质的方案，提高了亲和蛋白的制备效率。

作为概念验证，作者合成了几种不同长度的马来酰亚胺取代的芳基氟磺酸酯（MFS）连接头。为了筛选合适的MFS，作者首先根据蛋白质结构选定合适位点，并将其突变成半胱氨酸。随后通过化学修饰将不同长度的MFS连接到半胱氨酸上，由此产生共价候选药物。最后，将候选药物与靶向受体进行孵育，最后通过WB分析交联效率，选择交联效率最高者为首选药物用于后续实验。

作者选择了两种常见的亲和蛋白，亲和体（affibody）Z_HER2以及抗体类似物（monobody）Adnectin，并构建了共价偶联PE24毒素的蛋白。以后者为例，作者分析了Adnectin与EGFR 复合物的晶体结构，选定Thr14、Ser17、Thr56作为候选突变位点。筛选得到17号突变体并证明其能够与EGFR 靶标共价交联。后续作者通过细胞摄取、细胞毒性等实验证明共价结合可改善药物保留并提高药物疗效。

本文作者：ZF

责任编辑：WYQ

DOI：10.1021/jacs.5c02212

原文链接：https://doi.org/10.1021/jacs.5c02212