- A+
[FeFe]-氢化酶的活性位点辅因子由一个立方烷[4Fe-4S]-簇和一个独特的[2Fe-2S]-团簇组成,含有不寻常的CO-和CN-配体。[2Fe-2S]-簇的生物合成需要三种专用的成熟酶HydG、HydE和HydF。HydG和HydE都参与了[2Fe-2S]-前体的合成,但仍缺乏连接两个铁原子的氮杂二硫代硫酸盐(adt)部分。然后,该[2Fe-2S]-前体最终在支架蛋白HydF内形成,该支架蛋白结合并将[2Fe-2S]前体转移到氢化酶。然而,在与HydF中的确切结合模式仍然难以捉摸。
图片来源:J. Am. Chem. Soc.
有鉴于此,Ruhr University Bochum的Thomas Happe通过定点突变改变高度保守的蛋白质口袋的大小和电荷,确定了[2Fe-2S]-前体的结合位置。
图片来源:J. Am. Chem. Soc.
此外,这项研究还鉴定了两个丝氨酸残基对结合和组装[2Fe-2S]-前体是必不可少的。总之,在这项工作中,通过结合定点突变和分子对接模拟提供了一个关于[2Fe-2S]-簇如何与HydF结合的新模型,并证明了在adt部分的生物组装过程中一个高度保守的天冬氨酸残基的重要作用。
图片来源:J. Am. Chem. Soc.
原文标题:A Conserved Binding Pocket in HydF is Essential for Biological Assembly and Coordination of the Diiron Site of [FeFe]-Hydrogenases
原文作者:Rieke Haas, Oliver Lampret, Shanika Yadav, Ulf-Peter Apfel, and Thomas Happe*
https://doi.org/10.1021/jacs.4c01635
目前评论:0