- A+
糖蛋白是一类参与多种生理和病理过程的重要生物分子,其在体内的异常表达与多种生理病理密切相关,因此被广泛认为是临床诊断的生物标志物之一。在临床诊断中,实现糖蛋白的即时检测(POCT)对疾病的早期诊断和患者生存率的提高具有重要意义。酶联免疫吸附法(ELISA)具有选择性好、高通量等优点,被认为是临床糖蛋白常规检测的金标准。然而,由于需要完美配对的抗体、复杂的操作流程和相对有限的灵敏度(一般介于ng mL-1至mg mL-1),使得ELISA在临床诊断中的使用受到了限制。
鉴于此,南昌大学春华秋实课题组熊勇华研究员和黄小林教授与香港中文大学(深圳)唐本忠院士合作,提出以苯硼酸为糖蛋白识别单元,利用多价苯硼酸为糖蛋白交联剂诱导纳米聚集体形成,构建了一种快速、高灵敏检测血清中糖蛋白的动态光散射(DLS)免疫分析新方法。该方法巧妙结合了苯硼酸与糖蛋白反应的高亲和特性以及动态光散射信号的高灵敏优势,因而可在15 min内实现fM水平的糖蛋白定量分析。相关研究工作以“A Universal Boronate-Affinity Crosslinking-Amplified Dynamic LightScattering Immunoassay for Point-of-Care Glycoprotein Detection”为题在国际顶级期刊《AngewandteChemie International Edition》上发表。
本研究所设计的硼酸亲和交联放大动态光散射免疫分析方法由两部分组成,具体如图1所示:首先利用抗体修饰的磁性纳米颗粒(MNP@mAb)选择性捕获和分离复杂样品中目标糖蛋白;其次利用苯硼酸和糖蛋白中的顺式二醇选择性地结合诱导磁性纳米探针交联聚集,进而导致纳米颗粒的平均水化动力学直径(DH)增加。随后借助动态光散射分析仪记录DH的变化,以实现对目标糖蛋白的定量检测。
图1硼酸亲和交联放大动态光散射免疫分析方法用于糖蛋白检测的示意图
具体而言,首先以抗体修饰的138 nm磁性纳米粒子(MNP138@mAb)为免疫磁珠、甲胎蛋白(AFP)为模式分析物、8arm PBA为交联剂探究了硼酸亲和交联放大动态光散射免疫分析方法的可行性。如图2所示,实验结果证实了在目标糖蛋白AFP存在时,8arm PBA能够通过硼酸亲和作用诱导纳米粒子聚集导致其DH的急剧增加。
来源:高分子科学前沿
目前评论:0